Влияние антропогенного загрязнения

Наиболее широко изучено влияние на образование клеток с аномалиями ядра антропогенного загрязнения окружающей среды. В Центрально-Черноземном регионе были проведены исследования, выявившие статистически значимое увеличение числа клеток с микроядрами в буккальном эпителии человека (Буторина, 2000б; Микроядерный тест в … , 2003) в антропогенно загрязненных районах.

Частота встречаемости микроядер в эпителиоцитах ротовой полости детей (по Микроядерный тест в… , 2003)

Обозначения:
* – различия с Советским районом г. Воронежа достоверны (P < 0,05);
** – различия с Советским районом г. Воронежа достоверны (P < 0,01);
*** – различия с районом № 2 г. Нововоронежа достоверны (P < 0,05);
**** – различие с районом № 2 с. Землянск достоверно (P < 0,05)

Было установлено, что в 1999 г. у обследованного контингента детей из Советского района г. Воронеж частота встречаемости клеток с микроядрами статистически достоверно превышала таковую у детей из других районов города и составила – 1,28±0,23%.

Достоверных различий между уровнями клеток с микроядрами у обследованных детей из остальных районов города не выявлено, что, по-видимому, обусловлено небольшими различиями в загрязнении указанных районов кластогенами.

В 2000 – 2001 гг. наблюдалось статистически достоверное (P<0,01) уменьшение частоты встречаемости клеток с микроядрами в буккальном эпителии детей, однако, в 2001 г. в Советском и Коминтерновском районах этот показатель был выше, чем в Ленинском районе. Причиной этого может являться загрязнение атмосферного воздуха в данных районах формальдегидом и бенз(а)пиреном.

Так как в норме большинство клеток с микроядрами, имеющих измененную антигенную структуру мембраны, элиминируется из организма посредством лимфоцитов-киллеров, то высокие показатели частоты встречаемости микроядер в клетках слизистого эпителия ротовой полости детей, проживающих в Советском и Коминтерновском районах, позволяют говорить об ослаблении у них защитных реакций организма и возможном наличии в окружающей среде неидентифицированных иммунодепрессантов. Это предположение подтверждается высокой заболеваемостью детей в названных районах инфекционными и паразитарными заболеваниями, а также высокой частотой встречаемости новообразований по сравнению с аналогичными показателями в Ленинском и Левобережном районах. Показатели заболеваемости по этим нозологическим формам в Советском районе превышают средние по РФ (Эколого-гигиенические основы мониторинга …, 2002).

В 2002 г. наблюдалась следующая картина: в Ленинском районе показатель частоты встречаемости микроядер остался на уровне 2001 г., в Коминтерновском районе средняя частота встречаемости микроядер снизилась в 3,1 раза по сравнению с аналогичным показателем в предыдущий год исследования, а в Советском – возросла в 1,8 раза и статистически достоверно превышала показатели в двух других районах (P<0,01). В то же время среднее значение частоты встречаемости микроядер в эпителиоцитах ротовой полости детей в г. Воронеж осталось на уровне 2000 – 2001 гг. На основании полученных результатов был сделан вывод о сохранении напряжённой экологической ситуации на территории Советского и Ленинского районов г. Воронежа.

Территория г. Нововоронеж Воронежской области для удобства проведения исследований была поделена на три условных района:

  • Район № 1 расположен в северо-восточной части города. По данным Службы Госсанэпиднадзора суммарная техногенная загрязнённость этого района наименьшая по сравнению с двумя другими. Здесь отмечаются незначительные загрязнения почвы стронцием и хромом, а также повышенные против средних концентрации оксидов азота в атмосфере данного района.
  • Район № 2 расположен в северо-западной части города. Суммарная техногенная загрязнённость характеризуется средними значениями. Основными загрязнителями почвы являются стронций, хром и литий. Загрязнение атмосферного воздуха не отличается от района № 3 по основным компонентам и их концентрациям.
  • Район № 3 расположен в юго-западной части города и примыкает западной своей частью к пруду–охладителю НВАЭС. Техногенная загрязнённость данной территории максимальна по сравнению с двумя предыдущими. Среди загрязнителей почвы здесь отчетливо выделяются хром, стронций, медь, никель, ванадий, свинец, цинк; основные загрязнители атмосферы не отличаются от таковых в районе № 2 по концентрациям и качественному составу.

В результате исследования частоты встречаемости эпителиоцитов с ядерными нарушениями было показано, что уровни встречаемости микроядер в клетках слизистого эпителия ротовой полости в районах № 1 и № 3 статистически достоверно (Р<0,05) превышали данный показатель в районе № 2 и были практически равны. Полученные результаты свидетельствуют об ухудшении качества окружающей среды в районах № 1 и № 3, а также о возможном угнетении иммунитета у детей, проживающих на этих территориях.

Подтверждением сделанному заключению служат данные госсанэпидслужбы: общая заболеваемость детей в районе № 3 максимальна по сравнению с другими районами города и составляет 1000 случаев заболеваний на 1000 детей, в том числе болезнями органов дыхания – 800 – 900 случаев и инфекционными и паразитарными болезнями – 40 –50 случаев на 1000 детей.

Несмотря на то, что, по данным ГССЭН, в районе № 1 детская заболеваемость ниже, чем в районе № 3, и данная территория считается “экологически благополучной”, высокие значения частоты встречаемости клеток с микроядрами у детей, скорее всего, обусловлены загрязнением воздуха от автотранспорта и промышленных предприятий, сосредоточенных в основном в северо-восточной части города. Более того, частота встречаемости микроядер у детей в г. Нововоронеж не отличается от таковой в двух районах г. Воронеж (Коминтерновском и Советском) в 2000 г. Следовательно, загрязнённость атмосферного воздуха небольшого города Нововоронеж сопоставима с загрязнённостью районов крупного промышленного центра.

В с. Землянск наибольшая частота встречаемости микроядер наблюдалась у детей, проживающих в районе № 1, что позволяет говорить об ухудшении экологической ситуации на данной территории по сравнению с другим опытным районом. Однако невысокие показатели уровня цитогенетически аберрантных клеток буккального эпителия детей, проживающих в с. Землянск (различия с данным показателем у детей из г. Воронеж в 2001 г. достоверны, Р<0,001), свидетельствуют о сравнительно благоприятной экологической обстановке на территории указанного населённого пункта по сравнению с г. Воронеж, в частности, по загрязнению атмосферного воздуха.

Выполненное исследование можно рассматривать как результат цитогенетического мониторинга загрязнения окружающей среды районов г. Воронеж и Воронежской области с использованием микроядерного теста в буккальном эпителии человека (Калаев, 2009б).

Была выявлена корреляция частоты встречаемости клеток с микроядрами в буккальном эпителии человека с ядрышковыми характеристиками березы повислой, произрастающей в тех же районах (Буторина, 2002, Карпова, 2008; Использование морфологических характеристик … , 2006; Калаев, 2003, 2009б), что позволяет говорить о возможности экстраполяции результатов мониторинга, выполненного на древесных растениях, на человека. С использованием методов регрессионного анализа нами получена формула:

Y = - 2,482 + 0,603ln(X),

где Y – частота встречаемости микроядер в буккальном эпителии ротовой полости детей; X – площадь поверхности одиночных ядрышек в клетках корневой меристемы проростков семян берёзы повислой, позволяющая прогнозировать уровень клеток с микроядрами в буккальном эпителии у детей в изученном районе по площади поверхности ядрышек в клетках апикальной меристемы березы повислой.

Безусловно, приведенная формула, опирающаяся на цитогенетические показатели берёзы повислой, не отражает всего многообразия процессов, происходящих в организме человека под влиянием мутагенов. Однако факт установления такой зависимости заслуживает внимания, так как показывает возможность оценки генотоксичности окружающей среды для человека по цитогенетическим показателям древесных растений.

Дальнейшая апробация полученной формулы показала хорошее совпадение прогнозируемых по площади поверхности одиночных ядрышек в клетках апикальной меристемы и реальных значений частоты встречаемости клеток с микроядрами в буккальном эпителии детей в районах с разным уровнем антропогенного загрязнения окружающей среды (Калаев, 2006, 2009б)

Установлен высокий уровень корреляции между числом буккальных эпителиоцитов человека и эритроцитов лягушки с микроядрами с уровнем загрязнения территории промышленными предприятиями Донецкой области. Частота выявления клеток с микроядрами в эпителиальных клетках полости рта у обследованных лиц, проживающих в городах Донецк, Авдеевка несколько выше, чем у лиц, проживающих в г. Славяногорск (контрольная территория), и связана с показателем опасности территории по выбросам промышленных предприятий (Экспресс-оценка опасности … , 2008). Также выявлена связь уровня клеток с микроядрами с антропогенным загрязнением в городах республики Молдова. Дисперсионный анализ позволил выявить влияние района проживания на встречаемость микроядер как у мальчиков (влияние фактора достоверно, Р<0,001), так и у девочек (влияние фактора достоверно, Р<0,01), а также при анализе данных без разделения по половому признаку (влияние фактора достоверно, Р<0,001). Максимальное число клеток с микроядрами отмечается у детей, проживающих в наиболее загрязненном районе (Центр + Чокана) – 3,11±0,24‰; наименьшее – в "чистом" (Малая Малина) – 1,05±0,20‰; промежуточное положение занимает среднезагрязненный район – Ботаника (уровень клеток с микроядрами у детей, проживающих в нем, составил 2,80±0,13‰). Различия по частоте встречаемости клеток с микроядрами в буккальном эпителии детей между районами достоверны (влияние фактора достоверно, Р<0,001) (Оценка генотоксичности окружающей … , 2008; Левински, 2008а, 2008б).

Изучены цитогенетические нарушения в клетках слизистой оболочки полости рта у детей в одной из школ г. Москвы, в сельской школе Новгородской обл. Наименьшая средняя частота встречаемости клеток с кариорексисом наблюдается у детей из экологически чистого района – школы Новгородской обл. (13,9±8,5‰), а наибольшая – у детей из московской школы (170,9±23,5‰) (выше почти в 13 раз). Не различаются изученные массивы по средним частотам встречаемости двуядерных клеток, клеток с пикнозом, микроядрами и с повреждениями типа «разбитое яйцо» (Использование цитогенетического метода … , 2006). Экологическое благополучие детей в Москве было изучено Юрченко (Микроядерный тест эпителия … , 2007), в ходе обследования 223 детей в возрасте от 5 до 7 лет, посещающих дошкольные образовательные учреждения и школу, расположенные на 5 территориях Центрального административного округа Москвы, отмечены различия во встречаемости клеток с протрузией типа «язык», кариопикнозом, кариорексисом, кариолизисом, конденсацией хроматина в зависимости от суммарного загрязнения воздуха на исследуемой территории. Беляевой с соавт. (Медико-биологические критерии … , 2002; Медико-биологические критерии … , 2003) была показана корреляция доли клеток с кариопикнозом и лизисом в клетках слизистой оболочки детей школьного возраста с загрязнением разных округов Москвы. Также данным автором (Сопряженность изменений морфофункциональных … , 2010) было показано, что район проживания вблизи целлюлозно-бумажного комбината города Котласа можно считать неблагоприятным, так как у школьников, обучающихся неподалеку, повышена частота клеток с кариолизисом и протрузиями. Волковой (2010) было проведено сравнение встречаемости аномалий ядра у студентов, постоянно проживающих в городе Уфа, и у студентов, ранее проживавших в сельской местности. Оказалось, что частота ядер с кариопикнозом, кариорексисом выше в группах студентов, происходящих из сельской местности. При этом показатели уровня вакуолизации ядра, кариолизиса, конденсации хроматина и встречаемости апоптозных тел значительно выше у городских студентов.

По частоте встречаемости клеток с микроядрами не выявлено достоверных различий в двух группах сравнения. В англоязычной статье этих авторов (The analysis of … , 2011) были описаны подобные исследования, но результаты оказались немного иными. У сельских жителей преобладают клетки с вакуолизированными ядрами и конденсированным хроматином. У городских повышено число микроядер, протрузий, апоптозных тел, спаренных ядер, кариопикнозов в клетках. Из этого сделан вывод, что уровень нарушений в группе горожан выше из-за неблагоприятного эффекта среды, которая более мутагенна в Уфе. Было изучено генетическое состояние соматических клеток у детей школьного и дошкольного возраста г. Санкт-Петербурга, причем отмечено влияние фактора загрязнения района только на дошкольников (Чернякина, 2006, Оценка частоты микроядер … , 2010а, 2010б). Сычевой (2010) была проведена оценка влияния загрязнений г. Коряжмы Архангельской области на детей старшего школьного возраста, проживающих на разном удалении от целлюлозно-бумажного комбината. Изменений кариологических показателей выявлено не было. Исследования, проводимые в г. Курск, не выявили влияния районов, загрязненных выбросами аккумуляторных производств, на цитогенетический статус проживающих в них детей (Черных, 2006). Цитогенетические исследования, проведенные в крупном центре черной металлургии (г. Тула), большая часть предприятий которого расположена в Пролетарском районе (Привокзальный район был признан условно чистым), показали повышение уровня клеток с микроядрами, протрузиями, насечками в буккальном эпителии детей в более загрязненном районе (Бяхова, 2008; Кариологические и иммунологические … , 2010).

Проводимые в течниие 5 лет исследования антропогенного загрязнения атмосферного воздуха г. Орел показали, что максимальное число клеток с микроядрами отмечается у детей, проживающих в двух наиболее загрязненных районах (р-н Орловской ТЭЦ и Сталепрокатного завода) и составляет в среднем 2,78±0,36‰ и 2,32±0,27‰ соответственно; наименьшее число клеток с микроядрами (0,71±0,17‰) обнаружено у детей в районе ЗАО «Велор» (завод по производству керамической плитки), который является наиболее чистым (Ладнова, 2013).

Кариологические показатели (‰) у детей, проживающих в разных районах Тулы (по Кариологические и иммунологические … , 2010)

Обозначение: * – достоверное различие с показателями Привокзального района (Р<0,05)

Исследования, проведенные в разных по уровню загрязнения городах Днепропетровской области с высокой техногенной нагрузкой и интенсивно развитой металлургической, горнодобывающей, химической и другими видами промышленности, отходы которых представляют опасность для живых организмов, не показали влияния поллютантов на частоту клеток с микроядрами (Горовая, 2002). В г. Чапаевск была проведена оценка влияния экотоксикантов, содержащих диоксины, на частоту встречаемости клеток с нарушениями у женщин, работающих на предприятии, где возможен профессиональный контакт с диоксинами (группа «Завод»); проживающих в районе города на расстоянии 3 км от завода (группа «Титовка») и женщин, проживающих в районе поселка Нагорный с незначительным загрязнением окружающей среды (группа «Нагорный»). В данной работе не установлено различий между группами, находящимися в условиях разного воздействия диоксинов, по частоте встречаемости эпителиальных клеток слизистой оболочки щеки с микроядрами. Однако установлено достоверное увеличение суммарной доли клеток с кариопикнозом и кариорексисом в ряду «Нагорный» < «Титовка» < «Завод». (Анализ частоты микроядер … , 2000; Диоксины и медико-генетические … , 2001). Было исследовано влияние диоксинов на женщин из сельских районов Вьетнама с различной степенью загрязнённости. Отмечена корреляция доли клеток с микроядрами и перинуклеарными вакуолями и степенью контакта с диоксинами женщин, проживающих на загрязненной территории (Жулева, 2000а,б). Уровень цитогенетических повреждений у людей, проживающих на загрязненной диоксинами территории Вьетнама, был изучен и Коваленко (Цитогенетические и кариологические … , 2010), показано увеличение числа клеток с вакуолизацией и кариолизисом ядра; влияния загрязнения на частоту встречаемости других аномалий не выявлено. Определены уровни микроядер в эксфолиативных клетках ротовой полости женщин (рожениц) г. Еревана и сельских районов Армении. Выявлено, что в обеих выборках уровни микроядер статистически достоверно не различались в течение двух исследуемых лет (2005 и 2006 гг.). Однако обнаружено, что у женщин сельской популяции эти показатели несколько выше, видимо, из-за влияния хлорорганических пестицидов, используемых в сельском хозяйстве (Микроядерный тест как … , 2008).

Sailaja (2006) также отмечает негативное влияние пестицидов на генетический аппарат человека. Pastor (Micronuclei in peripheral … , 2001; Occupational exposure to … , 2002), Lucero (Cytogenetic biomonitoring of … , 2000), в свою очередь, не выявил влияния пестицидов на генетическую систему сельскохозяйственных рабочих.

Изучен район реки Амазонки в Бразилии, в котором производят биотопливо из сахарного тростника, при этом жмых сжигают сахарного тростника во время сбора урожая. Показано, что у детей, проживающих в этом районе, частота встречаемости клеток с микроядрами значительно выше по сравнению с контрольной группой (Micronucleus frequency in… , 2012). Исследования, проведенные в Чеченской республике, представили убедительные доказательства неблагоприятного воздействия высоких уровней содержания нефтепродуктов в почве на здоровье детей, а именно – увеличение числа клеток с микроядрами, протрузиями, сдвоенными ядрами, двумя ядрами, конденсацией хроматина, вакуолизацией ядра, кариопикнозом, кариорексисом и кариолизисом в загрязненных районах (в двух селах, где в течение 15 лет проводилась первичная переработка нефти: село Долинск Грозненского района и село Мескер-Юрт Шалинского района), по сравнению с условно чистым районом, в котором подобного производства не было (село Гойты Урус-Мартановского района) (Джамбетова, 2009; Исследование ассоциации частот … , 2010).

Кариологические показатели буккальных эпителиоцитов у детей в изучаемых районах Чеченской республики (по Джамбетовой, 2009)

* — различия с условно контрольной группой достоверны (P<0,05);
** — различия с условно контрольной группой достоверны (P<0,01);
*** — различия с условно контрольной группой достоверны (P<0,001).

У военнослужащих, выезжающих в спецкомандировки в «горячие точки» Северного Кавказа, загрязненные нефтепродуктами, отмечалось повышение доли клеток с микроядрами по сравнению с контрольной группой, причем происходило это пропорционально частоте выездов в командировку, что авторы связывают с влиянием техногенного загрязнения местности и наличием постоянно высокого психоэмоционального напряжения (Овсянников, 2008). Vasudha Sambyal (High frequency of … , 2004) была проведена оценка цитогенетического статуса жителей индийской деревни, в которой используют воду, загрязненную тяжелыми металлами и сточными сбросами. Выяснилось, что доля микроядер не только повышена у обследуемых лиц, но и растет линейно с увеличением времени пребывания в деревне. Группа работ посвящена влиянию употребления питьевой воды, загрязненной мышьяком, на число аберрантных клеток в буккальном эпителии. Большая часть авторов отмечают повышенный уровень эпителиоцитов с микроядрами у лиц, контактирующих с мышьяком (Analyses of micronuclei … , 2001; A study in … , 2006; Cytogenetic damage and … , 2006; Micronucleus frequency in … , 2007). Гагошидзе (2004) установлено повышенное количество клеток с микроядрами у детей, проживающих на территориях, загрязненных мышьяком и его производными. Martinez (Micronuclei assessment in … , 2005) утверждает, что употребление воды, содержащей мышьяк, не вызывает повышения доли цитогенетических повреждений. Ghosh (Evaluation of cell … , 2008) был проведен анализ работ, посвященных влиянию мышьяка на кариологический статус клеток различных тканей: наибольшая чувствительность отмечена у лимфоцитов, но исследования на клетках буккального эпителия также имеют место.

На основании результатов проанализированных работ мы составили сводную таблицу встречаемости клеток с микроядрами в различных населенных пунктах, значения при этом были приведены к процентам для более удобного сопоставления полученных данных.

Частота встречаемости клеток с микроядрами в буккальном эпителии на территориях с разным уровнем антропогенного загрязнения

Таким образом, можно говорить, что уровень клеток с микроядрами в буккальном эпителии зависит от места сбора материала (типа генотоксикантов), обследуемого контингента лиц и определенного вклада, вносимого «авторской специфичностью» (субъективная компонента).

НАЗАД